一、凝集试验
1.概念 免疫凝集试验是指细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原(或抗体)的颗粒性载体,与相应抗体(或抗原)发生特异性反应,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象
2.原理 细菌、螺旋体或红细胞等颗粒性抗原在悬液中带负电荷,周围吸附一层与之牢固结合的正离子,外面排列了一层松散的负离子层,构成双层粒子云。在粒子云内界和外界之间的电位差形成Z电位。反应必须在一定pH及适量电解质存在下才能发生。溶液中负离子强度愈大,乙电位也就愈大。Z电位使得各颗粒相互排斥。当特异性抗体与相应抗原颗粒互补结合时,抗体的桥联作用克服了颗粒表面的Z电位而使颗粒聚集在一起。
3.分类
(1)直接凝集反应
1)玻片凝集实验:常用来做ABO血型鉴定
2)试管凝集试验:常用来做交叉配血和肥达试验以及外斐试验
(2)间接凝集反应
1)正向间接凝集反应:常用抗原致敏载体测抗体
2)反向间接凝集反应:常用抗体致敏载体测抗原
3)间接凝集抑制实验:即可测抗原也可测抗体
4)协同凝集反应:常用含有A蛋白的金黄色葡萄球菌作为载体
二、沉淀反应
1.概念 免疫沉淀试验是指可溶性抗原与相应抗体发生特异性结合,在适当条件下出现的沉淀现象。
2.原理 免疫沉淀试验的基本原理是将可溶性抗原与相应抗体置于温度、酸碱度适宜的一定电解质溶液中,两者按适当比例形成沉淀,产生浊度,或在琼脂等凝胶中形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环,并根据所形成的沉淀物计算待测抗原或抗体的含量。
3.分类
(1)液相沉淀反应
1)絮状沉淀反应:分为抗原稀释、抗体稀释和方阵滴定用来检测抗原抗体反应最适比例
2)免疫浊度测定:分为免疫散射比浊和免疫透射比浊,主要用来做抗原的定量检测。
(2)凝胶内沉淀反应
1)单向免疫扩散实验:用来做抗原的定量。
2)双向免疫扩散实验:可用来判断抗原抗体的相对含量和浓度
3)免疫电泳技术:将沉淀反应和免疫扩散实验相结合,对抗原或抗体进行定性或定量检测。
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